摘要 为探明野生樱桃李抗李根癌病种质与基因资源价值，以其自然杂交实生苗为试材，采用混合接种发根土壤杆菌（Agrobacterium rhizogens）和根癌土壤杆菌（A.tumefaciens）的方法研究了其对李根癌病的抗性。结果表明，接种后60天，野生樱桃李株最大瘤径为0～10.5mm，群体平均最大瘤径为2.7mm，根据抗性评价标准判定野生樱桃李高抗李根癌病。野生樱桃李对李根癌病的抗性存在广泛的株间分离现象，其实生群体中存在免疫、高度抗病、中度抗病、低度抗病、感病和易感病6种类型植株，这6种类型植株分别占群体总数的20%、42%、20%、10%、5%和3%。野生樱桃李实生后代中存在大量的对李根癌病免疫植株，是珍贵的抗李根癌病种质与基因资源树种。
关键词 李 野生樱桃李 李根癌病 抗性评价 种质资源 基因资源
根癌病是由土壤杆菌属（Agrobacterium）中的致癌菌株所引起的一种世界性重大木本植物根系传染性病害，主要在植株根部、根颈处形成大小不一的肿瘤，导致发病部位输导组织畸形，水分及养分运输受阻，植株生长发育不良，产量降低甚至死亡。根癌病主要为害果树、林木、观赏植物等，其病原菌可随寄主植物远距离传播，危害极大，是重要的植物检疫病害之一。我国果树根癌病主要分布在河北、北京、天津、辽宁、吉林、山东、河南、江苏、上海、浙江、福建等省市。由于根癌菌寄主范围广，加之其特殊的致病机制，防治难度很大，虽然近20年来其生物防治技术取得了重要突破，但选育抗病砧木品种仍是彻底解决果树根癌病危害的最佳技术途径。
野生樱桃李（Prunus divaricata Ledeb.）为蔷薇科李属植物，主要分布在我国天山、高加索、土库曼山地、小亚细亚和巴尔干半岛等地，新疆伊犁是它分布的最东端，在我国仅分布于新疆伊犁地区霍城县科古尔琴山海拔1000～1600m的大西沟和小西沟野果林区，是中国稀有濒危树种之一，属国家二级重点保护植物。野生樱桃李为灌木或小乔木，具有很强的耐寒性，其实生群体中存在大量对南方根结线虫、北方根结线虫、花生根结线虫、根癌土壤杆菌、发根土壤杆菌免疫型植株和极强抗酸型、极强抗碱型、极强抗盐型植株，并存在少量强抗旱型植株，是极优异的多抗型果树种质资源，但其对李根癌病的抗性评价尚未见研究报道，本研究旨在评价野生樱桃李对李根癌病的抗性，为全面评价其种质资源价值提供科学依据，为抗根癌病砧用樱桃李品种选育奠定理论基础。
1 材料与方法
1.1材料
试验于2011年在中国农业大学上庄实验站进行。野生樱桃李种子购自新疆维吾尔自治区伊犁州霍城县，沙藏90天后播种于10cm×10cm的营养钵中，共获得野生樱桃李实生苗100株，置于日光温室中养护。病原菌为刘常红自北京郊区桃园病株根癌肿瘤中分离、纯化、保存的具有强毒性的发根土壤杆菌（A.rhizo-genes）菌株Ap10和根癌土壤杆菌（A.tumefaci-ens）菌株Ap2的混合菌液，2种菌液的浓度均为1×108cfu/mL，体积比为1：1。
1.2接种
以株为单位对供试植株进行编号、挂牌登记、接种。接种部位为实生苗茎干地上10cm左右处，每株接种3个位点（重复3次），间距为1～1.5cm。接种用一次性7号注射器注入菌悬液，刺入深度以触及木质部为准，接种后用脱脂棉包扎保湿2天。接种后的植株在日光温室内养护。
1.3抗病性评价
接种后60天，用游标卡尺测量肿瘤直径。根据株最大瘤径和抗性评价标准逐一评价供试植株的个体抗性；根据供试群体株最大瘤径的平均值和抗性评级标准评价野生樱桃李对根癌病的群体抗性，再根据个体抗性评价结果统计供试群体中存在的抗性类型，并分析野生樱桃李实生群体对根癌病的抗性分离情况。
根据肿瘤直径大小，将野生樱桃李对李根癌病的抗性分为6个等级：免疫（I），不发病；高度抗病（HR），最大瘤径0.1～3.0mm；中度抗病（MR），最大瘤径3.1～5.0mm；低度抗病（LR），最大瘤径5.1～7.0mm；感病（S），最大瘤径7.1～10.0mm；易感病（HS），最大瘤径>10.0mm。
2 结果与分析
接种后观察发现，野生樱桃李实生苗根癌病的发病时间和肿瘤生长速度存在明显的株间差异，发病最早的为接种后7天，最晚的为接种后30天，发病越早肿瘤生长速度越快。结果表明，接种后60天野生樱桃李实生后代株最大瘤径为0～10.5mm，群体平均最大瘤径为2.6mm，根据抗性评价标准判定野生樱桃李实生后代高抗根癌病。个体抗性评价结果表明，野生樱桃李实生后代对李根癌病的抗性存在广泛的株间分离现象，100株实生群体中存在20株免疫、42株高度抗病、20株中度抗病、10株低度抗病、5株感病和3株易感病6种类型植株，这6种类型植株分别占群体总数的20%、42%、20%、10%、5%和3%（表1）。
3 小结与讨论
野生樱桃李高抗根癌病，其实生后代对李根癌病的抗性存在广泛的株间分离现象，其中存在免疫、高度抗病、中度抗病、低度抗病、感病和易感病6种类型，免疫、高度抗病、中度抗病、低度抗病、感病和易感病型植株分别占群体总数的20%、42%、20%、10%、5%和3%。野生樱桃李是优异的抗李根癌病种质与基因资源树种。
除葡萄等少数寄主植物外，多数植物的根癌病只发生在根系和根颈部位，但Stover等人对苹果砧木的研究结果表明，在人工接种条件下，植株地上部对根癌菌的侵染反应与地下部高度相关。刘常红、王仙林、罗磊等人的研究结果表明，新梢或苗茎接种根癌菌用于评价核果类果树抗根癌病性能评价也是可行的。相对于根系接种，苗茎或新梢接种无论对接种作业、发病观察，还是最终的肿瘤大小等测量调查都更加方便。因此，本研究也采用了苗茎接种的方法。
赵小兰等将月季抗根癌病性能分为高度抗病、中度抗病、中度感病和高度感病4个等级，刘常红等将核果类果树对根癌病的抗性分为免疫、高抗、中抗、感病和易感病5个等级，本研究在评价标准中去掉了中度感病，增加了低度抗病和感病2种类型，变为免疫、高度抗病、中度抗病、低度抗病、感病和易感病6种类型。