【关键词】转铁蛋白；视黄醇结合蛋白；α1微量球蛋白；肾功能 【中图分类号】R587.1 【文献标识码】A【文章编号】1004-4949（2012）10-0120-02目前DM的肾损害多以检测尿蛋白质、尿素、肌酐和β2微量球蛋白（β2-MG）作为主要指标，然而这些项目难以发现早期的肾损害。虽然β2-MG能反映早期的肾小管功能损害，但其在酸性尿液中易分解，常会出现假阴性。肾组织活体检查灵敏、准确，但因其创伤性而难于普及。本文旨在采用联合检测糖尿病患者尿液中的TRF、RBP、和α1-MG探讨寻找糖尿病早期肾损害的实验指标。
1 材料和方法
1.1 对象：糖尿病患者59例，均系本院病人，按WHO标准诊断。其中胰岛素依赖型糖尿病4例，胰岛素非依赖型55例，男29人，女30例，平均年龄52.8岁。本组糖尿病患者均无过敏、结缔组织病、高血压、感染和肿瘤等所至的肾损害，也无糖尿病心力衰竭和酮症酸中毒。根据尿蛋白定性将59例糖尿病患者分为DM1组（尿蛋白阴性）和DM2组（尿蛋白阳性）。对照组20例，均系健康体检人群，男9例，女11例，平均年龄42.5岁。
1.2 仪器：BIO-RAD MODEL680 酶标仪、BIO-RAD MODEL1575 洗板机、优利特-100尿液分析仪。
1.3 试剂和方法：TRF、RBP和α1-MG均采用酶联免疫吸附双抗体夹心法，试剂由上海德波生物技术有限公司提供。取中断尿3ml，离心取上清液供检测使用。
1.4 结果统计：采用两样本均数比较的t’检验以及相关回归分析。
2 结果
2.1 糖尿病患者和对照组三项指标的测定结果。
△与对照相比P0.05）。尿TRF、RBP和α1-MG三项指标，尿蛋白定性阳性组（DM2）与阴性组（DM1）相比均有显著性差异（t’=7.56，t a’= 3.60，P<0.001；t’=5.19，t a’=3.64，P<0.001；t’=5.32，t a’=3.65，P<0.001）。
2.2 在28例尿蛋白定性阴性患者中，尿TRF、RBP和α1-MG高于对照组分别是16例（占57.1%）、8例（占28.6%）和2例（占7.1%），其中8例RBP增高的尿标本TRF均增高，达100%，16例TRF增高的尿样仅有4例RBP增高，达25%。
2.3 相关分析，在DM2组中，TRF与RBP之间r=0.64，t=4.57，P<0.001；RBP与α1-MG之间r=0.72，t=5.58，P<0.001；表明TRF与RBP之间、RBP与α1-MG之间均呈正相关。
3 讨论
在生理状态下由于肾小球存在分子屏障和电荷屏障，肾小球滤过膜中允许分子量在4万以下的小分子蛋白通过，但绝大部分的小分子蛋白由肾小管重吸收。分子量在4-9万之间的中分子量蛋白不易滤过，分子量大于9万的大分子蛋白不能滤过。肾功能损害早期，肾小球基底膜上带电的已酰硫酸肝素、唾液酸等成分减少，使肾小球滤过膜的电荷减少，电荷屏障破坏，滤过膜上滤过孔径增大，尿液中中分子量蛋白滤出增加，则可提示肾小球功能受损，而尿中小分子量蛋白排泄增加，则提示肾小管重吸收功能受损[1]。
TRF分子量为7.7万，在正常血浆中带有负电荷，由于与滤过膜上所带负电荷的同性相斥作用，绝大部分的TRF不能通过滤过膜。结果2.1显示，20例正常对照尿液仅有少量TRF，28例尿蛋白定性阴性患者尿TRF与正常对照相比有显著差异，其中16人（占57.1%）尿TRF明显升高。比李氏[2]报道的68.57%略低，可能与病例数偏少有关。表明糖尿病患者尿中出现白蛋白之前已有尿TRF的明显升高即TRF出现较白蛋白要早。可能的原因是高血糖造成肾小球微血管病变和肾动脉硬化使肾小球滤膜上硫酸乙酰肝素合成减少，损伤了肾小球滤过膜静电屏障，使富含阴离子的中分子蛋白TRF在肾小球滤过膜处所受的静电排斥力大幅度降低或消失，致使TRF在尿中排泄增加。31例尿蛋白定性阳性患者，尿TRF能自由通过滤过膜大量进入尿液，此时肾小球滤过膜已不仅是早期的静电屏障损伤而是滤过膜小孔的增大。这一结果进一步说明尿液中TRF开始升高，就意味着肾小球滤膜开始损伤，因此TRF是糖尿病肾功能早期损害的较灵敏指标之一。 RBP系由肝脏合成，分子量为2.1万，健康人RBP的产生量相当恒定，但在血浆中绝大多数RBP与前白蛋白结合形成复合体，使小分子RBP成为中分子量蛋白，不能通过肾小球滤过膜。当复合体中视黄醇提供给视网膜后，RBP与前白蛋白亲和力降低而解离，便可自由通地过肾小球滤过膜，在肾小管几乎全部被重吸收，尿中RBP排出量取决于肾小管的重吸收功能。
α1-MG分子量3万，肝脏合成，在血清中以游离型和与IgA的结合型存在，仅游离型能自由通过肾小球滤过膜，几乎全部在肾小管重吸收。α1-MG与β2-MG一样均可出现在肾小管损伤时的低分子蛋白尿中，而肾小球性蛋白尿及混合性蛋白尿亦有α1-MG的明显增加，而尿α1-MG测定对各类肾功能损伤均有早期诊断意义。尿中α1-MG含量较少受肾外因素影响，且其测定一般不受尿液PH变动的影响，故被认为是较特异的肾功能早期诊断指标。
结果2.2表明，尿蛋白定性阴性时，尿RBP出现较α1-MG早，而TRF较之RBP出现更早，这表明糖尿病患者尿RBP较α1-MG能更早反映肾小管的损伤。糖尿病先损伤肾小球滤过膜，再损伤肾小管。这一结论与相关报道一致。这将为探讨糖尿病肾损害的机制及防治提供实验依据。结果2.3表明，TRF与RBP和RBP与α1-MG呈正相关，提示肾小管功能损害随肾小球滤过膜损伤的加重而加重。因此，尿TRF和RBP不仅能反映早期肾小球和肾小管的损害，而且也能反映肾功能的损害程度。
参考文献
[1]王凌旭，杨东伟.尿微量蛋白对Ⅱ型糖尿病早期肾功能损害评价的意义[J].职业与健康，2005，21（10）：1616.
[2]陈林俊，戴彩华，周芬.尿微量蛋白联合检测在糖尿病肾病早期诊断中的临床应用[J].赣南医学院学报，2007，27（3）：385.